100g de poudre d'agarose électrophorèse année LE

Un gramme de cette poudre peut être combinée avec 100 ml soit d'un TAE (Tris-acétate) ou TBE (Tris-borate) tampon, pour créer un gel à 1% qui est approprié pour electrophorersis analytique et preparative. Un polysaccharide, poudre d'agarose est cultivé à partir d'algues ou de varech, et est une forme plus pure de l'agar-agar. La matrice préférée pour la séparation et la purification de fragments d'acides nucléiques tels que l'ADN et l'ARN, l'électrophorèse d'agarose note voit largement utilisés dans les domaines de l'industrie pharmaceutique, médico-légale, génétique et d'autres dans le monde entier. Les deux composants de base de gel d'agarose sont la poudre d'agarose, et une solution tampon TAE tel que (Tris-acétate) ou TBE (Tris-borate). 1 gramme de poudre peut être combiné avec 100 mL d'une solution tampon pour créer un gel à 1% qui est approprié pour l'électrophorèse analytique et preparative. Comme la gélatine, la poudre d'agarose est sturred dans la solution tampon puis chauffé jusqu'à ce que se est complètement fondu. Flourescing colorants peuvent être ajoutés à ce moment, before le mélange est versé dans un plateau d'électrophorèse à se solidifier. L'électrophorèse sur gel est un procédé qui trie les acides nucléiques tels que l'ADN et l'ARN en fonction de leur taille et de la charge. L'utilisation d'un courant électrique, l'ADN peut être amené à se déplacer à travers le gel d'agarose. Les plus grosses molécules se déplacent plus lentement, tandis que les molécules plus petites seront voyager plus vite à travers le gel. Etant donné que différentes molécules de tailles différentes, chacun d'eux qui est différent, former des bandes distinctives qui sont visibles sur le gel. Fragments nucléiques peuvent être injectés dans les puits du gel en utilisant une pipette, une fois séparés et peut être transféré sur nitrocellulose ou de nylon membranes à l'aide d'une procédure de buvardage standard. Si un colorant fluorescent a été ajouté au mélange, une lumière noire peut être utilisée pour afficher les fragments séparés et prendre des photos pour une analyse future.